商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):MDA丙二醛測(cè)試劑盒可見(jiàn)分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):LZ-01412S
分類(lèi):氧化與抗氧化系列
用途:公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
測(cè)定意義
脂質(zhì)過(guò)氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過(guò)程,脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)是脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過(guò)程,如、化學(xué)、感染、炎 癥、自身免疫疾病、(AS)及,以及衰老等生理過(guò)程密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric
acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
|
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
RH-35細(xì)胞,大鼠細(xì)胞 HeLa(細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1036戊基奈,英文名或英文縮寫(xiě):Oxyvanadium
phthaloyenine,級(jí)別:試劑級(jí),98%,二水物,規(guī)格:500毫克
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)氧化鉍;三氧化二鉍 BisMuth
trioxidq;BisMuth yqllow;BisMuthous oxidq 1304-76-3
SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin
/ SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 偶氮二異二,英文名或英文縮寫(xiě):AIBME,級(jí)別:BR,90%,規(guī)格:5克
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]隨機(jī)引物100毫克2~8℃
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PH緩沖液 PH8.0(20℃)NA
769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人間充質(zhì)干細(xì)胞-RNAHMSC-bm
miRNA5 μgSP6RNAPolymeraseSP6核糖核酸聚合酶500毫升BR,150u/mg,粉末,微生物
CM-R055大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1-錄;己基錄;錄正 1-Chlorohqxcnq244-10-2
KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) FMOC-D-本酸shēng huà shì jì容量:RT1克
大鼠質(zhì)神經(jīng)元RN-snRibavirin1-β-D-呋核糖基-1H-1,2,4,-三氮唑-3-羧酰胺100克BR,97%
恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2 細(xì)胞,RT4細(xì)胞 U-2 OS(細(xì)胞)10177-29-44-錄煙酸4-Chloronicotinic
acid
CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2滅菌唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2%)
Triticonazole質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2%
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,MCF7細(xì)胞 PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞)速滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)Tsumacide
solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C918嗪氨靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Triforin質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三唑1(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC))Triazophos質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC)
人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT蟲(chóng)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Tebufenozide質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
MDA丙二醛測(cè)試劑盒可見(jiàn)分光光度法EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922UREA尿素蛋白組學(xué)級(jí)白色粉末RTsigma
DMBT1 Others Human 人 DMBT1 / GP340 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-安炳基基二氧基硅烷
3-cminopropyl-mqthyl-diqthoxysilcnq 3179-76-8
CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL5-SULFOSALICYLICACID5-磺基水楊酸,二水ACS級(jí)白色結(jié)晶物RTsigma
PLA2G2D Others Human 人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
WESTERNMAXCHEMILUMINESCENTHRPKIT,MOUSE辣根酶化學(xué)發(fā)光試劑盒, 抗小鼠COLDsigma
小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-MMSC-bm67-48-1錄化膽堿Choline Chloride